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Takara Cas9核酸酶，一款功能強大的基因編輯工具酶！
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CRISPR/Cas9基因編輯包括兩大組件：“向導”sgRNA和“剪刀”Cas9核酸酶，二者共同作用，結合形成切割復合體，能夠靶向地對外源基因進行敲除、插入、定點突變等編輯，使得定點基因組改變的難度明顯降低，可進行操作的目標生物種類大大增加。
在基因編輯實驗中，如何將sgRNA和Cas9蛋白質導入細胞是十分重要的環節，選擇到合適的方法或體系可以大大提高基因編輯的成功率。
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目前基因編輯技術較為成熟，針對不同的細胞，更是開發出了多種導入體系，較為成熟完善的傳統體系有質粒載體導入、病毒載體導入，比較新穎且有特色的體系有納米囊泡系統導入以及RNP復合物的直接導入。在實驗條件允許的情況下，相對于其他導入方式，RNP復合物的直接導入更加突出了以下幾點優勢：
1、不使用Cas9基因，從而有效抑制由于基因殘留使Cas9持續表達造成的脫靶現象
2、不存在由于蛋白質轉錄、翻譯表達所引起的時間滯后，可實現快速有效的突變導入
3、不需要考慮每個靶向生物的啟動子和密碼子
4、可以控制導入的Cas9蛋白質的量
而Cas9核酸酶作為RNP復合物重要組成部分，選擇并使用一款優質的Cas9核酸酶就變得異常重要。Takara有來源于野生型釀膿鏈球菌的重組Cas9蛋白質，助力基因編輯，錨定靶點切割！Guide-it Recombinant Cas9蛋白質含量較高，可滿足電穿孔、顯微注射等多種不同復合物導入方式，C末端的NLS核定位信號可以實現快速有效的突變導入，且經過不斷的產品優化已證實對哺乳動物細胞具有良好的耐受性，可降低導入哺乳動物細胞時所造成的細胞損傷，使脫靶效應最小化的同時，更容易實現高效率的基因編輯。
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更穩定！更高效！
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1.不同公司Cas9產品在hiPS細胞中基因敲除效率比較
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實驗案例：Cellartis hiPSC-18細胞系中的基因敲除
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數據來源于Takara Bio USA, Inc.
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通過剪切后的條帶強度可以對編輯細胞所占的百分比進行半定量估計。凝膠底部的每個數字代表所示RNP的基因編輯效率（以百分比表示）。結果顯示，與其他品牌推薦的制備向導RNA的方法相比，Guide-it Recombinant Cas9與Guide-it In Vitro Transcription Kit制備的sgRNA結合使用，可以為許多靶點提供一致且有效的基因編輯。
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更廣泛！更普適！
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2.不同細胞系人誘導多能干細胞（hiPSC）中基因敲除效率比較
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實驗案例：多系人誘導多能干細胞（hiPSC）CD81基因敲除
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在本實驗中，將Cas9-sgRNA RNP復合物通過電穿孔方式導入至hiPSC-18 和hiPSC-22兩種誘導多能干細胞中敲除CD81基因。CD81抗體染色后，流式細胞術檢測結果顯示，電穿孔10天后hiPSC-18的敲除效率為91％，hiPSC-22的敲除效率為85％，顯示出非常高的基因編輯效率。
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更多應用場景！
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3.Guide-it Recombinant Cas9用于基因敲入實驗
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實驗案例：AAVS1和CXCR4基因同源定向修復
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Panel A. 這些圖表展示了CD34+造血干細胞的HDR實驗是如何完成的。將含有Hind III酶切位點的ssDNA模板插入AAVS1基因中，將同時含有Hind III和BamH I酶切位點的模板插入CXCR4基因中。每側同源臂長度為90 bp。
Panel B. 將修復模板和Cas9/sgRNA RNPs通過電穿孔導入后，用PCR擴增靶細胞中各目標基因，并進行酶切分析。編輯效率顯示在凝膠上每個陽性孔上面。CXCR4基因經過BamH I酶切后顯示出一條額外條帶，原因是基因編輯前野生型基因中已經存在一個BamH I位點了。基因編輯5天后，我們證實98%的造血干細胞CD34+染色陽性。
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更多生產標準級別！
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4.GMP級別Cas9核酸酶效率驗證
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為了滿足更多臨床研究試驗的需求，Takara提供批次差異更低的產品，面向需要更高產品品質的用戶，我們也同時提供Recombinant Cas9 Protein GMP grade，即GMP級別的Cas9核酸酶，制造過程中不使用人源或動物源成分，已通過日本藥品與食品安全局（PFSB）的GMP級別標準生產測試，得到生產許可，并在該標準下進行制造和品質管理，適用于體外細胞工程和基因治療研究。
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以敲除293T細胞CD81基因為例，對Guide-it Recombinant Cas9（632641）和Recombinant Cas9 Protein GMP grade（T230）進行基因組組編輯性能對比，結果證實T230具有與632641/632640相同的基因組編輯效率。
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關聯產品推薦
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sgRNA的體外轉錄和篩選系統
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可以被用來合成和檢測sgRNAs效率。該試劑盒包含了體外轉錄和純化sgRNAs，以及檢測重組Cas9核酸酶對PCR靶向片段剪切效率，可用于CRISPR/Cas9 研究中sgRNA的制備、純化和評價。
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· 通過體外轉錄有效制備用于CRISPR/Cas9基因編輯高品質sgRNA的簡便試劑盒
· 所制備sgRNA可用于體外剪切活性確認實驗和突變導入實驗
· sgRNA的產量、簡便性及性價比進一步優化提升
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