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告別RNA提取,方便快速的細(xì)胞材料qPCR!

2022-08-12文章來源:takarabiomed
告別RNA提取,方便快速的細(xì)胞材料qPCR!
 
從培養(yǎng)的細(xì)胞中提取RNA大約需要45分鐘,操作復(fù)雜,大部分研究人員卻仍然使用這種傳統(tǒng)的基因表達(dá)分析方法。
 
Takara給您一個(gè)全新的選擇!
快速、方便、簡單的操作體驗(yàn):CellAmp系列讓您能夠在10 分鐘內(nèi)提取RNA,且操作極其簡單,最短1.5小時(shí)即可完成從RNA提取、反轉(zhuǎn)錄到qPCR的全過程。
 
 
CellAmp的特點(diǎn),不只【節(jié)省時(shí)間】這一點(diǎn)!
 細(xì)胞裂解代替RNA提取,無需加熱失活DNase,適用于高通量分析
·無需進(jìn)行RNA提取,可直接以細(xì)胞為模板制備樣品。
·新品裂解液CellAmp? Direct Lysis set(Code No. 3738A)不需要反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)前DNase失活的熱處理操作,減少了操作的繁雜性。分析時(shí)間大幅縮短(最短約1.5小時(shí))。
·適用于高通量分析。
 
 iPS細(xì)胞等干細(xì)胞分化而來的細(xì)胞也可以使用
·通過對裂解buffer的改良,cell line化的貼壁細(xì)胞、懸浮細(xì)胞、原代培養(yǎng)細(xì)胞、各種干細(xì)胞、iPS細(xì)胞等均可以使用。
 
 裂解液可長期保存
·新品CellAmp裂解液3738,增加了組分Stop Solution, 提高了裂解液的穩(wěn)定性。
·-20℃可穩(wěn)定保存6個(gè)月。
 
 Real Time PCR試劑具有強(qiáng)抗阻害性和高特異性
·經(jīng)典CellAmp裂解液3732,可兼容大多數(shù)Takara兩步法或一步法RT-qPCR試劑。
·新品CellAmp裂解液3738,搭配qPCR試劑TB Green? Fast qPCR Mix (Code No. RR430) 和Probe qPCR Mix (Code No. RR391), 實(shí)現(xiàn)了對PCR阻害物的強(qiáng)抵抗性。稍長的目的基因和高 GC 含量的目的基因也可以擴(kuò)增。
 
下面我們用數(shù)據(jù)說話!
實(shí)驗(yàn)例1.使用CellAmp與使用純化的RNA作為模板,結(jié)果有差異嗎?
【實(shí)驗(yàn)方法】
·樣本:HeLa細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞、HEK293細(xì)胞、NHDF細(xì)胞、iPS 細(xì)胞 (253G1, STO+)
·方法:使用CellAmp 試劑制備細(xì)胞裂解物 vs 常規(guī)柱法從每種細(xì)胞中純化total RNA。
·目的基因:每種細(xì)胞,對應(yīng)使用包含88種生物通路相關(guān)基因和8種管家基因引物對的PrimerArray系列,進(jìn)行RT-qPCR解析。
 
【試劑】
CellAmp? Direct TB Green® RT-qPCR Kit (Code No. 3735)
 
【實(shí)驗(yàn)結(jié)果】
以純化的total RNA作為模板得到的Ct值,與以CellAmp試劑裂解液作為模板得到的Ct值,相關(guān)性良好。
即使樣本是iPS細(xì)胞,使用CellAmp也可以輕松檢測基因表達(dá)水平。
 
實(shí)驗(yàn)例2. CellAmp與其他品牌的同類產(chǎn)品比較,性能怎樣?
【實(shí)驗(yàn)方法】
·樣本:HeLa細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞、HEK293細(xì)胞
·試劑:CellAmp vs T公司同類產(chǎn)品
·操作方法區(qū)別:細(xì)胞裂解結(jié)束后,加入Stop Solution,吸打混勻。CellAmp無需其他操作;T公司產(chǎn)品需要額外室溫孵育2 min的步驟。
·該實(shí)驗(yàn)比較了加入Stop Solution后孵育不同時(shí)間的Ct值。
孵育時(shí)間分別為:0 min,2 min,20 min,30 min,60 min
 
【實(shí)驗(yàn)結(jié)果】
使用T公司產(chǎn)品時(shí),Stop Solution后孵育2 min的步驟必不可少的,但結(jié)果依然可能不穩(wěn)定,得到不同的Ct值。
使用CellAmp試劑時(shí),添加Stop Solution后,無需在室溫下孵育細(xì)胞裂解液,操作更容易,并且可以獲得更穩(wěn)定的結(jié)果。
 
細(xì)胞裂解、反轉(zhuǎn)錄、qPCR,您可以選擇所需的組分,也可以選擇完整解決方案。
CellAmp系列產(chǎn)品一直在默默努力,滿足您所想所需。
 
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·不同時(shí)期的iPS誘導(dǎo)細(xì)胞作為樣本,不純化RNA,qPCR效果是否依然出色呢?
·使用CellAmp進(jìn)行不純化RNA的探針法qPCR,結(jié)果會(huì)不會(huì)遜于常規(guī)方法?
更多實(shí)驗(yàn)例,點(diǎn)擊下方鏈接,下載新版CellAmp宣傳冊吧!

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