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酵母雙雜交Y2H

均一化Mate & Plate文庫
品牌	Code No.	包裝量	價格	說明書	數量
Clontech	630479	5×1 ml	13,781 元
Clontech	630486	5×1 ml	13,781 元
Clontech	630488	5×1 ml	13,781 元
Clontech	630484	5×1 ml	14,411 元
Clontech	630487	5×1 ml	13,781 元
Clontech	630485	5×1 ml	13,781 元
Clontech	630480	5×1 ml	13,781 元
Clontech	630481	2×1 ml	6,903 元
Clontech	630482	2×1 ml	6,903 元
Clontech	630483	5×1 ml	13,781 元

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Code No.	產品名稱
630479	Mate & Plate^? Library - HeLa S3 (Normalized)
630486	Mate & Plate^? Library - Human Brain (Normalized)
630488	Mate & Plate^? Library - Mouse Brain (Normalized)
630484	Mate & Plate^? Library - Mouse Embryonic Stem Cell (Normalized)
630487	Mate & Plate^? Library - Universal Arabidopsis (Normalized)
630485	Mate & Plate^? Library - Universal Drosophila (Normalized)
630480	Mate & Plate^? Library - Universal Human (Normalized)
630481	Mate & Plate^? Library - Universal Human (Normalized)
630482	Mate & Plate^? Library - Universal Mouse (Normalized)
630483	Mate & Plate^? Library - Universal Mouse (Normalized)

均一化的酵母雙雜交cDNA文庫——Normalized Mate & Plate

■ 制品說明

Normalized Mate and Plate Libraries是高度復雜的cDNA文庫，文庫克隆到GAL4 AD載體上并轉化到酵母菌株Y187中。因為文庫擴增和酵母轉化操作已經完成，所以使用這些文庫進行雙雜交篩選更加省時省力。均一化處理降低了文庫中高豐度的轉錄本，低豐度及稀少的cDNA得以富集，這樣的文庫更加具有基因代表性，也使篩選操作更加簡單，并大大降低了在篩選文庫時獲得假陽性的可能性。
· 操作僅需三步：
1. 用Matchmaker Gold Yeast Two-Hybrid System構建表達目的蛋白質的酵母菌株。
2. 將bait菌株與1 ml均一化文庫混合過夜培養。
3. 鋪板于篩選培養基上。
· 什么是均一化文庫？
均一化處理降低了cDNA文庫中高豐度轉錄本所占的比例，這意味著許多管家基因的拷貝數顯著降低，所以篩選的克隆數更少，并且可以確保篩選到包含中等豐富和低等豐度轉錄本的克隆。簡而言之，您可以花費較少的精力篩選到更多的獨立克隆，并有更大的機會檢測到重要的互作。
· 如何制備均一化文庫？
首先用SMART技術擴增獲得cDNA，之后用雙鏈特異性核酸酶（DSN）進行均一化處理（1,2）。簡單來說，cDNA經變性及退火后，用特異切割雙鏈DNA的酶快速酶切，因為cDNAs豐度越高退火越快，越有可能被酶降解。最后，用Northern blot方法分析cDNA均一化效率，將均一化的cDNA文庫克隆到prey載體pGADT7-RecAB上。
· 通用型文庫提供通用型基因覆蓋范圍
人和小鼠通用型文庫提供了廣泛且完善的表達基因覆蓋范圍。這些均一化通用型文庫來自于不同的齊全組織，這些特異挑選的組織能夠代表廣闊范圍內表達的基因（2）。結合“全面的”基因代表性及低拷貝cDNAs的富集度，Mate & Plate Universal (Normalized) Libraries為鑒定新的真實的互作提供了更大的可能。
· 為什么使用均一化通用型文庫?
事實上，許多有意義的互作發生在位置適宜但表達較弱的蛋白質之間，這類互作用傳統的單一組織文庫不容易檢測到。通用型且均一化的文庫為這個問題提供了有效的解決方法，因為這些文庫代表了平衡的轉錄本，能夠更大范圍的覆蓋表達的基因。因此，篩選不再局限于僅能鑒定出單一組織中高水平表達的蛋白質之間的互作。

■ 制品特點

1. 為蛋白質互作中的文庫篩選提供簡便方法。
2. 篩選更少的克隆，檢測更多的互作。
3. 通用型文庫——更高的基因代表性。
4. 篩選不再大海撈針。

■ 制品用途

1. 酵母雙雜交文庫篩選。

■ 文獻

1. Zhulidov, P. A. et al. (2004) Nucleic Acids Res. 32(3):e37.
2. Shagin, D. A. et al. (2002) Genome Res. 12(12):1953-1942.

產品詳情請點擊以下鏈接：

http://www.clontech.com/CN/Products/Protein_Interactions_and_Profiling/Yeast_Two-Hybrid/Libraries/Mate_and_Plate_Normalized?sitex=10022:22372:US

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酵母雙雜交Y2H