|
|||||
■ 制品說明 | |||||
Mate & Plate的優點 | |||||
如果不使用Clontech的預制Mate & Plate Libraries,構建和篩選一個傳統的酵母雙雜交文庫是非常繁冗的。而使用預制文庫,只需將MATα型文庫菌株和轉入誘餌基因構建體的MATa型酵母菌株共同過夜孵育,然后將接合后的菌液涂板于合適的選擇培養基上即可,操作簡便。Clontech提供多種組織特異的、均一化的通用文庫,適用于絕大多數文庫篩選。 | |||||
需要自己的文庫嗎?您可以自己制作,簡便而且快速。 | |||||
如果Mate & Plate Libraries中沒有適合您需要的文庫,您可使用Make Your Own Mate & Plate Library System自己制作文庫。利用該系統,一周之內即可構建足夠用于數百次酵母雙雜交篩選實驗的所需文庫。文庫構建是在Y187文庫酵母菌株中通過酵母高效的同源重組機制直接完成的 (圖1),無需傳統文庫構建過程中的一些繁冗的操作 (比如文庫克隆、擴增和大腸桿菌收集等)。 | |||||
經濟有效的操作以及SMART技術 | |||||
該系統利用Clontech的SMART cDNA合成技術,使用任意組織來源的少至100ng的總RNA,即可構建cDNA文庫。SMART技術利用了MMLV (Moloney murine leukemia virus) RT的末端轉移酶活性和模板轉換機制,合成的一鏈cDNA序列末端含有已知的通用引物結合位點。因此,SMART一鏈cDNA可以通過PCR進行擴增,然后與具有末端同源序列的Matchmaker Gold 獵物載體pGADT7-Rec進行重組。基于以上特征,使用納克級的RNA (例如來源于顯微解剖組織、激光捕獲細胞或者活檢樣品) 即可合成cDNA,共轉化這些cDNA和pGADT7-Rec到酵母菌株Y187中,即可直接構建文庫。 | |||||
■ 制品特點 | |||||
1. 利用SMART?技術在酵母中直接構建文庫 2. 無需繁瑣的克隆或文庫擴增 3. 足夠用于數百次的雙雜交篩選 |
|||||
產品詳情請點擊以下鏈接: | |||||
http://www.clontech.com/CN/Products/Protein_Interactions_and_Profiling/Yeast_Two-Hybrid/Yeast_Two-Hybrid_Library_Construction?sitex=10022:22372:US |