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[通知]
Takara嵌合法Real Time PCR(qPCR)產品的名稱從2017年12月下旬開始,將逐步變更為「TB Green系列」。產品Code、性能和原有產品相比沒有變化,請繼續放心使用。
產品名稱將隨新lot的產品逐步變更,產品網頁或操作說明書可能會先于產品標簽變更,望知悉!
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→詳情請點擊此處
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■ 制品內容 (RR430S:50 μl反應×40次、RR430A:50 μl反應×200次)
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Code No. RR430S
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RR430A
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TB Green Fast qPCR Mix (2×Conc.)*1
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1 ml
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1 ml × 5
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ROX Reference Dye (50×Conc.)*2
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40 μl
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200 μl
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ROX Reference Dye II (50×Conc.)*2
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40 μl
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200 μl
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*1 內含改良突變型Taq HS,dNTP Mixture,Mg2+,Tli RNaseH,TB Green。
*2 使用在Applied Biosystems的Real Time PCR擴增儀上,用以校正孔與孔之間產生的熒光信號誤差。
◆ 需用ROX Reference Dye (50×) 的PCR儀
Applied Biosystems 7300 Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)
StepOnePlus Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)
◆ 使用ROX Reference Dye II (50×) 的PCR儀
Applied Biosystems 7500和7500 Fast Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)
◆ 不需要使用ROX的PCR儀
Thermal Cycler Dice Real Time System III (Code No. TP950/TP970/TP980/TP990)
Thermal Cycler Dice Real Time System II (Code No. TP900/TP960)
Thermal Cycler Dice Real Time System Lite (Code No. TP700/TP760)
LightCycler 96/LightCycler 480 System (Roche Diagnostics)
CFX96 Real-Time PCR Detection System (Bio-Rad)
Smart Cycler System/Smart Cycler II System (Cepheid)
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Limited Use Label License:[M40], [M82]
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■ 制品說明
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本制品是采用TB Green嵌合熒光法進行Real Time PCR的專用試劑。制品中適用于快速PCR反應的突變型Taq DNA聚合酶與適合抗Taq抗體的反應液組合使用,可降低引物二聚體出現頻率,實現快速PCR反應和在寬廣的動態定量區域內對靶基因進行準確定量、檢測,重復性好。此外, 2×Premix試劑中,已預先添加了Tli RNaseH (耐熱性RNaseH) ,以cDNA作為模板進行PCR反應時,可以很好抑制由于cDNA中殘存mRNA對PCR反應造成的阻害作用。通過對酶和PCR反應液組份改良后,可適用于稍長片段的靶基因和高GC含量的靶基因,對PCR阻害物也有很強的抵抗性。本制品是2×濃度的Premix型試劑,預先混有適合實時監測濃度的TB Green,配制PCR反應液十分簡便。
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■ 保存
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4℃。
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注意:
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1. 4℃可保存6個月。
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2. 避光保存,避免污染。
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3. -20℃運輸。
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4. 長期保存請置于-20℃,一旦開始使用請于4℃保存并在6個月之內使用完。
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■ 試劑盒特長
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1. 通過Real Time PCR反應,可以快速、準確地對目的基因進行檢測、定量。
2. 本制品是預先混有TB Green的2×濃度的Premix試劑,只需加入引物、模板、滅菌水便可通過嵌合熒光檢測法進行Real Time PCR反應。
3. PCR反應使用的是可進行快速PCR反應的突變型Taq HS。由于優化的反應Buffer非常適用于Real Time PCR,因此擴增效率高,可以進行高靈敏度的檢出。
4. 在2×Premix試劑中,預先添加了耐熱性RNaseH (Tli RNaseH) ,可以很好抑制以cDNA作為模板進行PCR反應時,由于cDNA中殘存mRNA對PCR反應造成的阻害作用。
5. 酶和PCR反應液組份通過改良后,提高了對PCR阻害物的抵抗性。
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■ 注意事項
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1. 進行Real Time RT-PCR反應時,反轉錄反應所用的試劑推薦使用:
PrimeScript? RT reagent Kit (Perfect Real Time) (Code No. RR037Q/A/B)
PrimeScript RT Master Mix (Perfect Real Time) (Code No. RR036Q/A/B)
以上制品與本制品組合使用可以得到可信度高的結果。
本制品與PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) (Code No. RR047Q/A/B) 組合使用時,有時反應性能不好,不推薦使用。
2. 使用前,請上下輕輕顛倒混勻,避免產生氣泡,試劑混勻后再使用。試劑混合不均勻會造成反應效果不佳。
(1) 請勿渦旋振蕩混勻。
(2) TB Green Fast qPCR Mix (2×) 在-20℃保存時,可能會產生白色或淡黃色的沉淀??捎檬治站徛芙?,或于室溫短時間避光放置后,上下顛倒混勻直至沉淀全部消失。
(3) 沉淀會導致試劑組份不均勻,必須混勻后再使用。
3. 配制反應液時,試劑請于冰上放置。
4. 本制品中含有熒光染料TB Green,配制PCR反應液時應避免強光照射。
5. 反應液的配制、分裝請一定使用新的一次性槍頭、量盡量避免樣品間的污染。
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