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■ 制品內容 (Code No.: RR042A)
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TaKaRa LA Taq HS
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125 U
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10×LA PCR Buffer II (Mg2+ Plus)(25 mM)
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1 ml
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dNTP Mixture (各2.5 mM)
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400 μl
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■ 制品說明
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本制品是抗Taq 單克隆抗體和TaKaRa LA Taq 的混合制品,適用于Hot Start PCR。高溫加熱前抗Taq 單克隆抗體與LA Taq 酶結合,抑制聚合酶活性,可以抑制低溫條件下由引物的非特異性退火或引物二聚體引起的非特異性擴增。抗Taq 單克隆抗體在PCR反應最初的DNA變性步驟中變性,無需特殊失活處理,可以在常規PCR條件下使用。
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■ 保存
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-20℃。
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■ 活性定義
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用活性化的大馬哈魚精子DNA作為模板/引物,在74℃、30分鐘內,攝入10 nmol的全核苷酸為酸性不溶物的活性定義為1個活性單位 (U)。
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■ 純度
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50 U的本酶和1 μg的λ-Hind III、1 μg的Supercoiled pBR322 DNA或1 μg的λDNA在74℃下反應1小時,均未檢出內切酶和外切酶活性。
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■ 用途
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Hot Start PCR法擴增DNA片段,適用于15 kb以上DNA片段的 擴增。
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■ PCR產物
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使用本制品擴增得到的大部分PCR產物3’端附有一個“A” 堿基,因此可直接克隆于T-Vector中。但克隆片段過長 (大于5 kb),TA克隆效率將會降低。也可以將PCR產物進行末端平滑化和磷酸化后克隆到平滑末端載體中。
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■ PCR反應性能
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1. 以λ DNA為模板,可以很好地擴增20 kb和35 kb的DNA片段。
2. 以人的基因組DNA為模板,可以很好地擴增17.5 kb (β-Globin gene) 的DNA片段。
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