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多功能酶:Tks Gflex

TaKaRa Tth
品牌 Code No. 包裝量 價格 說明書 數量
Takara R510A 250 U 991 元
 
■ 制品內容
TaKaRa Tth (5 U/μl) 50 μl
10×Tth PCR Buffer (Mg2+ plus) 1 ml
Tth RT-PCR Buffer 1 ml
dNTP Mixture (10 mM each) 150 μl
50 mM Mn(OAc)2 250 μl
 
 
■ 制品說明
Tth DNA polymerase是把Thermus thermophilus HB-8 DNA Polymerase的基因經過克隆轉化到大腸桿菌中進行表達后,分離提取而得到的,它與天然Tth DNA 聚合酶具有相同的功能。
本酶具備一般的耐熱性DNA聚合酶特性,無3'—5'DNA外切酶活性,且在Mn2+離子存在的條件下,其即便在高溫條件下也可以顯示反轉錄活性,利用該特性,可用同一酶在同一管中進行反轉錄反應與PCR反應(1-STEP RT-PCR)。 
 
■ 保存
-20℃。 
 
■ 起源
Escherichia coli carrying a plasmid that encodes the Tth DNA Polymerase gene.
 
■ 活性定義
用活性化的大馬哈魚精子DNA作為模板/引物,在74℃,30分鐘內,攝入10 nmol的全核苷酸為酸性不溶物的活性定義為1個活性單位(U)。
 
■ 純度
1) 10 U的本酶和1 μg的λ-Hind III在65℃下反應4小時,未檢出外切酶活性。
2) 10 U的本酶和1 μg的Supercoiled pBR322 DNA在74℃下反應2小時,未檢出內切酶活性。
3) 10 U的本酶和1 μg的16S,23S rRNA在37℃下反應4小時,未檢出RNA分解酶活性。
4) 10 U的本酶和1 μg的λDNA在37℃下反應16小時,未檢出DNA分解酶活性。
 
■ 用 途
1) PCR法擴增DNA Tth DNA Polymerase在高溫下(95℃)能夠持續保持很高的活性,可以用于DNA片段的擴增,且具有5'→ 3'外切酶活性。
2) RT-PCR在Mn2+存在的情況下,Tth DNA Polymerase具有RT酶活性,且沒有RNase H活性,能夠應用于RNA的檢測。

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