|
本制品是Real Time RT-PCR用的理想反轉錄反應試劑。使用具有較強延伸能力的PrimeScript RTase可以在較短時間內高效合成Real Time PCR用cDNA。操作簡單，適合進行高通量分析。進行2 Step Real Time RT-PCR反應時，與SYBR® Premix Ex Taq? II (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR820Q/A/B) 、SYBR Fast qPCR Mix (Code No. RR430S/A/B) ， SYBR Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR420Q/A/B) 、 或Probe qPCR Mix (Code No. RR391S/A/B) 試劑配合使用，能進行高性能的基因表達分析。 本制品提供了SYBR Green分析法和探針分析法各自適合的反應體系，可以根據(jù)分析方法選擇體系。
|
|
|
|
■ 保存
|
-20℃。
|
|
|
|
■ 試劑盒特長
|
1. 可以快速、高效合成Real Time PCR用cDNA，是進行2 Step Real Time RT-PCR反應的理想試劑。
2. 含有Oligo dT Primer和Random 6 mers兩種反轉錄引物，可根據(jù)實際情況區(qū)別使用。反轉錄反應可以使用Random 6 mers或Oligo dT Primer，也可以Oligo dT Primer和Random 6 mers同時使用。只擴增一種目的基因時，也可以使用Specific Primer作為反轉錄引物。
3. 本制品提供了SYBR Green qPCR分析法和探針qPCR分析法各自適合的反應體系，可以根據(jù)分析方法選擇體系。
注意：以下是SYBR Green qPCR分析法和探針qPCR分析法進行反轉錄實驗的區(qū)別
① 用于反轉錄實驗RT Primer Mix添加量。
② 用于反轉錄實驗total RNA的添加量。
4. Real Time RT PCR定量需要建立標準曲線，建立標準曲線的條件就是需要將總RNA和反轉錄cDNA稀釋到較低的濃度。如果用水或TE Buffer稀釋時，由于模板濃度低不穩(wěn)定，因而會縮小曲線范圍，結果精度降低。本制品中附加了標準曲線制作用稀釋液EASY Dilution (for Real Time PCR)，將Total RNA或cDNA稀釋至低濃度時也能夠進行準確稀釋，容易在寬廣范圍內獲得準確定量的標準曲線。
|
|
|
|
|
|
■ 使用注意
|
1. 當同時需要進行數(shù)次反應時，應先配制各種試劑的混合液 (Master Mix；其中包括RNase Free dH2O、Buffer、酶等)，然后再分裝到每個反應管中。這樣可使所取的試劑體積更準確，減少試劑損失，避免重復分取同一試劑。同時也可以減少實驗操作或實驗之間產生的誤差。
2. 用PrimeScript RT Enzyme Mix I 時使用前要小心地離心收集到反應管底部。由于酶保存液中含有50%的甘油，粘度高，分取時應慢慢吸取。同時，要使用精確、量程適合的移液槍，并且不要使Tip插入液面過深，否則會因Tip壁粘著造成損失。
3. 分裝試劑時務必使用新的槍頭 (Tip)，以防止樣品間污染。
|
|
|
