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qPCR反轉錄kit

cDNA合成

PrimeScript^? RT Master Mix (Perfect Real Time)
品牌	Code No.	包裝量	價格	說明書	數量
Takara	RR036Q	10 μl反應 × 20 次	265 元
Takara	RR036A	10 μl反應 × 200 次	1,980 元
Takara	RR036B (A × 4)	10 μl反應 × 800 次	7,520 元

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■ 制品內容 (Code No.: RR036A: 10 μl反應×200次量)

5×PrimeScript RT Master Mix (Perfect Real Time)^*1	400 μl
RNase Free dH2O	1 ml ×2
EASY Dilution (for Real Time PCR)^*2	1 ml

1 含有PrimeScript RTase、RNase Inhibitor、Random 6 mers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、反應Buffer (含有Mg²⁺) 。 2 制作標準曲線時梯度稀釋cDNA或RNA標準品的稀釋液。模板cDNA或RNA如果用水或TE Buffer稀釋時，由于受Microtube吸附作用等的影響，往往不能準確地進行稀釋，導致實驗結果精度降低。使用本制品時，即使稀釋至低濃度也能夠進行準確地稀釋，容易在寬廣范圍內獲得準確定量的標準曲線。EASY Dilution (for Real Time PCR) 也可以單獨購買 (Code No.: 9160/9160Q)。注意：EASY Dilution請與本公司Real Time PCR試劑組合使用，對于其他公司的同類制品的適用性本公司尚未進行確認。

■ 制品說明

本制品是2 Step Real Time RT-PCR用的理想反轉錄反應試劑。5×PrimeScript RT Master Mix中含有定量RT-PCR的反轉錄反應所需的所有試劑 (PrimeScript RTase、RNase Inhibitor、Random 6 mers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、反應Buffer)，加入模板RNA和水即可迅速進行反應。使用具有較強延伸能力的PrimeScript RTase，與制品PrimeScript RT reagent Kit (Perfect Real Time)(Code No.: RR037Q/A/B) 相同，可以在較短時間內高效合成Real Time PCR用模板cDNA。本制品合成的cDNA可以用于SYBR^® Green qPCR分析法和探針分析法，可以根據實驗目的與SYBR Premix Ex Taq^? II (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR820Q/A/B) 、SYBR Fast qPCR Mix (Code No. RR430S/A/B) 和Probe qPCR Mix (Code No. RR391S/A/B) 等定量試劑配合使用，能夠進行高性能的基因表達分析。
注意：Takara Bio使用SYBR Green I 作為研究試劑已得到Molecular Probes Inc.的許可。

■ 保存

-20℃。

■ 試劑盒特長

1. 制品為預先混好的Premix形式，只需加入模板RNA和水便可以開始反應。
2. 可以在較短時間內高效合成Real Time PCR用cDNA，是進行2 Step Real Time RT-PCR反應的理想試劑。
3. 使用了Random 6 mers和Oligo dT Primer 2種反轉錄引物，可以合成適合Real Time PCR用cDNA。
4. Real-time RT PCR定量需要建立標準曲線，建立標準曲線的條件就是需要將總RNA和反轉錄cDNA稀釋到較低的濃度。如果用水或TE Buffer稀釋時，由于模板濃度低不穩定，因而會縮小曲線范圍，結果精度降低。本制品中附加了標準曲線制作用稀釋液EASY Dilution (for Real Time PCR)，將Total RNA或cDNA稀釋至低濃度時也能夠進行準確稀釋，容易在寬廣范圍內獲得準確定量的標準曲線。

■ 注意事項

1. 5×PrimeScript RT Master Mix在使用前要小心地離心收集到反應管底部。由于5×PrimeScript RT Master Mix粘度高，用移液槍慢慢反復吸打充分混勻后使用。
2. 分裝試劑時務必使用新的槍頭 (Tip)，以防止樣品間污染。
3. 本制品中已經加入了反轉錄Primer（Oligo dT Primer 和Random 6 mers），如果要使用Gene Specific Primer進行反轉錄反應，則不能使用本制品。

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qPCR反轉錄kit

技術信息

實驗案例

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參考文獻